همسانه سازی cdna ژن تیوردوکسین vvtrxh) h) از بافت حبه انگور رقم یاقوتی (vitis vinifera l. cv. yaquti)

تیوردوکسین ها پروتئین هایی فراگیر و از لحاظ وزن مولکولی کوچک (معمولا شامل 100 تا 120 آمینو اسید) بوده و دارای پل دی سولفیدی انفعالی با توالی های کاملا حفاظت شده - –cys- gly (ala/pro)- pro- cys می باشند. در این تحقیق، پس از استخراج rna کل ازبافت های برگ و حبه انگور (vitis vinifera l.) رقم یاقوتی، سنتز cdna ازrna استخراجی صورت پذیرفت. ژن تیوردوکسین h تحت عنوان vvtrxh ، با استفاده از تکنیک واکنش زنجیره ای پلیمراز(pcr) استاندارد از بافت حبه، جداسازی و در ناقل پلاسمیدی puc19 همسانه سازی گردید. ژن vvtrxh در روش مشابهی در ناقل دوگانه pbi121 متصل گردیده و سرانجام به اگروباکتریوم تومفاسینس (سویه pgv3101)، منتقل شد. نتایج توالی یابی نشان داد که ژن همسانه سازی شده، تیورودکسیون h بوده و حاوی یک چارچوب باز خواندنی منفرد به طولbp 345 می باشد که یک پروتئین با 114 اسید آمینه را کد می کند. این ژن حاوی جایگاه فعال غیر معمولrcglc ، اسید آمینه تریپتوفان ویژه w و یک موتیف ساختاری درگیر در انتقال سلول به سلول در انتهای آمینوی (maee) خود می باشند. بررسی های ترتیب توالی با استفاده از نرم افزارهای blastp و clustalw، شباهت زیادی را بین توالی پروتئینی پیش بینی شده این ژن با ژن مورد نظر در بانک ژن ncbi و با تیوردوکسین h سایر گیاهان نشان داد. همچنین بررسی روابط فیلوژنتیکی به روش دندروگرام با استفاده از نرم افزار clustalw نشان داد که این آیزوفرم متعلق به زیرگروه i تیوردوکسین های h می باشد. کلمات کلیدی: انگور، همسانه سازی، تیوردوکسین، رقم یاقوتی، باند دی سولفیدی.